考馬斯亮藍法測蛋白含量測定試劑盒

產(chǎn)品型號：

更新時間：2024-07-09

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生化檢測試劑盒-常量法

谷胱甘肽過氧化物酶4（GPX4）活性檢測總谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測 α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測硫代葡萄糖苷含量檢測生物堿含量檢測總氧化狀態(tài)（TOS）檢測 α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測植物銨態(tài)氮含量檢測試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測試劑盒細胞酸性磷酸酶細胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列信號系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

考馬斯亮藍法測蛋白含量測定試劑盒說明書
酶標法 100 管/96 樣
產(chǎn)品簡介：
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
在酸性溶液中，考馬斯亮藍 G-250 與蛋白質(zhì)結合形成藍色復合物；該復合物在 595nm 處有大吸收峰，
其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比。該方法靈敏度高，適合微量蛋白質(zhì)分析。
試驗中所需的儀器和試劑：
酶標儀、酶標板、移液器和蒸餾水。
產(chǎn)品內(nèi)容：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。
標準品：液體×1 瓶，4℃保存。
操洽步驟：
一、樣品中可溶性蛋白質(zhì) 提取：
液體樣品：澄清無色液體樣品可以直接測定。
組織樣品：準確稱取約 0.1 g 樣品，加 1mL 提取液（自備，根據(jù)需要可以是酶提取緩沖液或者蒸餾水或
者生理鹽水），冰浴勻漿，10000rpm，4℃離心 10min，取上清，即待測液。（動物樣品常常需要稀釋）
二、吸光值測定：
1. 酶標儀預熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到 595nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 空白孔：取酶標板，在空白孔中加入 20µL 蒸餾水， 180µL 試劑一，混勻后室溫靜置 10min，于 595nm
測定吸光度，20min 內(nèi)完成測定，記為 A 空白。
3. 標準孔：取酶標板，在空白孔中加入 20µL 標準液， 180µL 試劑一，混勻后室溫靜置 10min，于 595nm
測定吸光度，20min 內(nèi)完成測定，記為 A 標準。
4. 測定孔：取酶標板，在空白孔中加入 20µL 待測液， 180µL 試劑一，混勻后室溫靜置 10min，于 595nm
測定吸光度，20min 內(nèi)完成測定，記為 A 測定。
蛋?質(zhì)含量計算：
C 待測（µg/m L）= C 標準×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)
=50×(A 測定－A 空白)÷(A 標準－A 空白)
C 標準：標準品蛋白質(zhì)濃度，50µg/mL。
注意事項：
1．加考馬斯亮藍后，在 10~20min 內(nèi)吸光值相對較穩(wěn)定，因此須在 10~20min 完成比色。
2．不宜用石英比色皿，可用玻璃或塑料比色皿，測完成后立即用 95%乙醇（自備）沖洗。
3．測定前用 1~2 個樣做預實驗，確保蛋白濃度在 0~100µg/ml 范圍內(nèi)，否則需要做相應稀釋。