北京索萊寶科技有限公司
專(zhuān)注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
服務(wù)熱線：18101056239
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產(chǎn)品型號(hào)：紫外分光光度法
更新時(shí)間：2024-07-08
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
訪 問(wèn) 量 ：1837
010-50973130
產(chǎn)品分類(lèi)
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胰蛋白酶測(cè)試盒
貨號(hào)：BC2310
規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：可見(jiàn)分光光度法
測(cè)定意義：
胰蛋白酶選擇性水解變性蛋白質(zhì)中由賴(lài)氨酸或精氨酸的羧基所構(gòu)成的肽鏈，是一種重要的消化酶。此外，胰蛋白酶還廣泛應(yīng)用于膿胸、血胸、外科炎癥、潰瘍、創(chuàng)傷性損傷等所產(chǎn)生的局部水腫、血腫及膿腫等的輔助治療。
測(cè)定原理：
胰蛋白酶催化水解BAEE的酯鍵，生成BA，BA在253nm處有吸收峰，通過(guò)測(cè)定253nm 吸光度增加速率，即可計(jì)算出胰蛋白酶的活性。
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。
一、 粗酶液提?。?/strong>
稱(chēng)取約 0.1g 樣品，加入 1mL 提取液進(jìn)行冰浴勻漿，10000 rpm 4℃離心 10min，取上清液，即粗酶液，置冰上待測(cè)。或者直接稱(chēng)取 1mg 酶粉，加 1mL 提取液，充分混勻后置冰上待測(cè)（為保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性建議梯度稀釋?zhuān)?br />二、 測(cè)定：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到 253 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液的配制：將試劑一與試劑二按 2:97 配置工作液，按需配制，并置于 37℃水浴預(yù)熱 30min以上。
3. 空白管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 蒸餾水，混勻，迅速于 253nm測(cè)定 0s 和 60s 的吸光度，記為△A 空白。
4. 測(cè)定管：取 1mL 石英比色皿，加入 990µL 工作液，再加入 10μL 粗酶液，混勻，迅速于 253nm測(cè)定 0s 和 60s 的吸光度，記為△A 測(cè)定。
三、 胰蛋白酶活性計(jì)算：
1.按蛋白濃度計(jì)算：
活性單位（U）定義：在 1mL 體系下，37℃每毫克蛋白質(zhì)每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個(gè)單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測(cè)定-△A 空白) ÷0.001÷（Cpr×V1）÷T
=100000×(△A 測(cè)定-△A 空白) ÷Cpr2.按樣本鮮重計(jì)算：
活性單位（U）定義：在 1mL 體系下，37℃每克組織每分鐘催化 253nm 處吸光值增加 0.001 為一個(gè)單位。
胰蛋白酶（U/mg prot）= (△A 測(cè)定-△A 空白) ÷0.001÷（W×V1÷V2）÷T
=100000×(△A 測(cè)定-△A 空白) ÷W
Cpr：粗酶液蛋白質(zhì)濃度（mg/mL），需要另外測(cè)定；W：組織質(zhì)量（g）；V1：加入反應(yīng)體系中粗酶液體積（mL），10μL=0.01 mL；V2：粗酶液總體積（mL），1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間（min），1min。
實(shí)驗(yàn)前用 1～2 個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn)，保證吸光值變化在 0.01～0. 15 之間。
胰蛋白酶測(cè)試盒訂購(gòu)說(shuō)明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過(guò)截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后，將底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
運(yùn)輸說(shuō)明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶(hù)的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中無(wú)需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫(kù)房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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