殺稻瘟菌素 S（Blasticidin S）圖片
貨號(hào)：B9300
規(guī)格：10mg/100mg
別名 : 滅稻瘟素 
CAS : 3513-03-9 
分子式 : C17H27CIN8O5 
分子量 : 458.9 
儲(chǔ)存條件 : -20℃ 
純度 : >95%（HPLC） 
單位 : 瓶

產(chǎn)品濃度：10mg/ml

Selection antibiotic: cell culture tested, sterile reagent

作用機(jī)理

     Blasticidin S是一種來(lái)自Streptomyces griseochromogenes的核苷類(lèi)抗生素，通過(guò)干擾核糖體中肽鍵的形成來(lái)特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsr或BSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式，很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。

抗性基因

     目前已經(jīng)克隆和測(cè)序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種，一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙?；D(zhuǎn)移酶基因bls，另外兩種是脫氨酶基因，包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr和 BSD基因是常用的篩選標(biāo)志，用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)，也可用于E.Coli。

運(yùn)輸與保存方法

    冰袋（wet ice）運(yùn)輸。收到產(chǎn)品后放到-20 ºC保存，有效期少1年，避免反復(fù)凍融。

應(yīng)用濃度

1）Escherichia coli

     E. coli對(duì)Blasticidin S的敏感性稍差，但是轉(zhuǎn)化子對(duì)Blasticidin S具有耐受性，可以用低鹽LB培養(yǎng)基（pH 8）進(jìn)行篩選，濃度范圍為50-100 μg/ml Blasticidin S。高pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2）哺乳動(dòng)物細(xì)胞

     哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過(guò)滅殺曲線來(lái)確定佳使用濃度。

- 25-100 µg/ml in bacteria

- 1-30 µg/ml in mammalian cells

操作步驟（哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選）

     Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsr或BSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，在含有Blasticidin S的正常生長(zhǎng)培養(yǎng)基中孵育，用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

   （1）轉(zhuǎn)染后48h，用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代（注：細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作好。細(xì)胞密度太高，抗生素效率降低。細(xì)胞分盤(pán)時(shí)覆蓋率好不超過(guò)25%）；

   （2）每3-4天去除培養(yǎng)基，加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基；

   （3）7天后檢測(cè)細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類(lèi)和轉(zhuǎn)染/篩選效率，集落形成可能需要增加一周或更久。

   （4）轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35mm細(xì)胞盤(pán)中，加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)。

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2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過(guò)程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來(lái)，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
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