儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱(chēng)
硫氧還蛋白還原酶活性檢測(cè)試劑盒輔酶
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱(chēng)
Oxidized Thioredoxin Reductase(TrxR) Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見(jiàn)分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/48S
自備試劑
該試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需自備試劑，詳情見(jiàn)網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)

產(chǎn)品型號(hào)：BC1150-50T/48S

更新時(shí)間：2024-04-07

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

訪問(wèn) 量：1887

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品分類(lèi)

PRODUCT CLASSIFICATION

生化檢測(cè)試劑盒-常量法

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4（GPX4）活性檢測(cè) 總谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px/GPX）活性檢測(cè) α-L-巖藻糖苷酶（AFU）活性檢測(cè) 硫代葡萄糖苷含量檢測(cè) 生物堿含量檢測(cè) 總氧化狀態(tài)（TOS）檢測(cè) α-基丁酸脫氫酶（α－HBDH）活性檢測(cè) 3-磷酸甘油酯酶（GPP）活性檢測(cè) 水溶性物質(zhì)羥自由基清除能力檢測(cè) 植物銨態(tài)氮含量檢測(cè)試劑盒血清（漿）二胺氧化酶（DAO）活性檢測(cè)試劑盒細(xì)胞酸性磷酸酶細(xì)胞堿性磷酸酶果膠系列轉(zhuǎn)氫酶系列光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測(cè)定系列其它系列信號(hào)系列土壤系列離子系列 P450系列糖代謝系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列三羧酸循環(huán)系列線粒體呼吸鏈系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列 ATP系列抗逆系列抗氧系列氧化系列維生素C代謝系列谷胱甘肽系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列

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產(chǎn)品介紹

硫氧還蛋白還原酶（TrxR）活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
可見(jiàn)分光光度法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動(dòng)，請(qǐng)注意并嚴(yán)格按照該說(shuō)明書(shū)操作。
貨號(hào)：BC1150
規(guī)格：50T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

試劑三：試劑放于瓶?jī)?nèi)玻璃瓶中，臨用前取1瓶加入3.33 mL蒸餾水溶解，用不完的試劑-20℃保存2周；
試劑四：體積量少，請(qǐng)離心后再使用。臨用前根據(jù)樣本數(shù)量將試劑四用無(wú)水乙醇稀釋10倍后使用。

產(chǎn)品說(shuō)明：
TrxR（EC，EC 1.8.1.9）是一種NADPH依賴(lài)的包含FAD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶，屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員，與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類(lèi)似，催化*G還原生成GSH，是谷胱*肽氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP⁺，TNB在412nm有特征吸收峰，但還原型谷胱*肽與DTNB同樣能反應(yīng)生成TNB，因此本試劑盒利用2-乙烯吡啶抑制樣本中原有的還原型谷胱*肽，通過(guò)測(cè)定412nm波長(zhǎng)處TNB的增加速率，即可計(jì)算TrxR活性。
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細(xì)胞超聲破碎儀、蒸餾水、冰和無(wú)水乙醇。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：

哺乳動(dòng)物組織及血液制品TrxR活力測(cè)定時(shí)，一般須用蒸餾水稀釋5倍左右；測(cè)定過(guò)程操作須迅速。
由于試劑一中含有一定濃度的蛋白（約0.1mg/mL），所以在測(cè)定樣本蛋白濃度時(shí)需要減去提取液本身的蛋白含量。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

取0.1g月季花朵加入1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿，10000rpm，4℃離心10min，取上清置冰上，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA =（A2測(cè)定-A1測(cè)定）-（A2空白-A1空白）=（0.763-0.716）-（0.082-0.064）=0.029，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：TrxR（U/g 質(zhì)量）=147×（ΔA測(cè)定管-ΔA空白管）÷W=42.63 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠肝臟組織加入1mL 試劑一進(jìn)行冰浴勻漿，10000rpm，4℃離心10min，取上清稀釋2倍置冰上，按照測(cè)定步驟操作，測(cè)得計(jì)算ΔA =（A2測(cè)定-A1測(cè)定）-（A2空白-A1空白）=（1.508-0.4）-（0.082-0.064）=1.09，按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得：TrxR（U/g 質(zhì)量）=147×（ΔA測(cè)定管-ΔA空白管）÷W×2（稀釋倍數(shù)）=3204.6 U/g 質(zhì)量。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

Li B, Li D, Jing W, et al. Biogenic selenium and its hepatoprotective activity[J]. Scientific reports, 2017, 7(1): 1-11.
Zhang L, Fan J, He J, et al. Regulation of ROS–NF‐κB axis by tuna backbone derived peptide ameliorates inflammation in necrotizing enterocolitis[J]. Journal of cellular physiology, 2019, 234(8): 14330-14338.

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