尿酸（UA）含量檢測試劑盒說明書
微量法
注意：本產(chǎn)品試劑有所變動，請注意并嚴格按照該說明書操作。
貨號：BC1365
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑四：粉劑置于試劑瓶內(nèi)玻璃管中。臨用前加入6 mL試劑一，充分混勻后備用；用不完的試劑-20℃分裝保存，避免反復凍融。-20℃可保存4周。

2. 標準品：2.5 µmol/mL 尿酸溶液。

3. 工作液A的配制：按照試劑二：試劑三：試劑四=250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于樣本測定管、空白管及標準管的檢測。根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。

4. 工作液B的配制：按照試劑二：試劑三：試劑一 =250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于樣本對照管的檢測。根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。

產(chǎn)品說明：
尿酸為嘌呤代謝的終末產(chǎn)物，嘌呤代謝紊亂、能量代謝異常及腎臟對尿酸的排泄障礙等均可引起血漿尿酸水平升高或降低，進而導致多種疾病如通風、腎病、心血管疾病的發(fā)生，尿酸含量的測定在臨床診斷中有著重要的指導意義。
尿酸酶催化尿酸分解為尿*素、CO₂和H₂O₂，H₂O₂氧化亞鐵*中的Fe²⁺生成Fe³⁺，F(xiàn)e³⁺進一步與4-氨基安*比林和酚反應生成紅色醌類化合物，在505nm處有特征吸收峰，通過測定505nm處的吸光值來計算尿酸的含量。


技術(shù)指標：
低檢出限：0.00388 μmol/mL
線性范圍：0.003906-0.8 μmol/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：


可見分光光度計/酶標儀、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、蒸餾水、冰、EP管。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：

1. 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。注意同步修改計算公式。

2、工作液A與工作液B，需根據(jù)樣本量現(xiàn)配現(xiàn)用，配后建議2小時內(nèi)用完（2-8℃或者冰上保存）。工作液為淡黃色溶液，如有變色，則視為失效，需重新配制。
實驗實例：

1. 取0.1g大鼠腎臟加入1mL提取液進行勻漿研磨，離心取上清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.591-0.347=0.244，帶入標曲y=1.7648x+0.0127，計算x=0.131，按樣本質(zhì)量計算含量得：

UA含量（μg/g質(zhì)量）=168x÷W=168×0.131÷0.1=220.08 μg/g 質(zhì)量。

1. 取鵝血清后按照測定步驟操作，使用96孔板測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.217-0.093=0.124，帶入標曲y=1.7648x+0.0127，計算x=0.063，按液體體積計算含量得：

UA含量（μg/mL血清）=168x =168×0.063=10.584 μg/mL血清。
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