總巰基含量檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
微量法
貨號(hào)：BC1375
規(guī)格：100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：
標(biāo)準(zhǔn)品：10 mg還原型谷*甘肽（GSH）。臨用前加入1.3 mL蒸餾水，配制成25 µmol/mL，2-8℃保存兩周。
產(chǎn)品說(shuō)明：
生物體內(nèi)巰基主要包括谷*甘肽巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì)，而且參與活性氧清除，后者對(duì)于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測(cè)定總巰基含量和GSH含量，能夠間接測(cè)定蛋白質(zhì)巰基含量。
巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-*甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。

技術(shù)指標(biāo)：
最檢出限：0.0088 μmol/mL
線性范圍：0.015625-1 μmol/mL
注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴鍋、研缽/勻漿器和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng)：
如果測(cè)定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定。注意同步修改計(jì)算公式。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Yang X, Xu J, Fu C, et al. The cataract-related S39C variant increases γ S-crystallin sensitivity to environmental stress by destroying the intermolecular disulfide cross-links[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020.

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