原果膠含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC3685
規(guī)格：100T/48S
產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 提取液一：80%乙醇，自備。即將80 mL無水乙醇和20 mL蒸餾水混合。

2. 試劑一：濃硫酸30 mL，自備。

3. 標準品：10 mg半乳糖醛酸，臨用前加入0.943 mL提取液三，配成50μmol/mL的標準液。

產品說明：
果膠是植物細胞壁主要組成成分之一，分為水溶性果膠和不溶性果膠，不溶性果膠為原果膠。原果膠是不溶于水的物質，但可在酸、堿、鹽等化學試劑及酶的作用下，加水分解轉變成水溶性果膠，在食品、紡織、印染、煙草、冶金等領域具有較廣泛的應用。
原果膠在堿性條件下水解為可溶性果膠，并進一步轉化為半乳糖醛酸，產物在強酸中與咔 唑縮合生成紫紅色化合物，在530nm處有特征吸收峰。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽/勻漿器、丙 酮、濃硫酸、無水乙醇和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產品資料"附件
實驗實例：

1. 取0.1g木槿加入1mL 提取液一，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL 提取液一和丙 酮交替各洗2遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細胞壁，加入1mL提取液二浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，加入1mL提取液三，充分勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清液之后按照測定步驟操作，用96孔板測得計算ΔA測定= A測定管-A對照管=0.21-0.12=0.09，依據(jù)標準曲線y=0.4121x-0.0183計算X=0.2628μmol/mL，按樣本質量計算含量得：原果膠含量(μmol/g 質量)=x÷W=2.628 μmol/g 質量。

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