透析袋 扁寬31截留分子量100-500 耗材
貨號：YA1069
規(guī)格：0.5m/即用型

使用前處理：

1. 把透析袋剪成適當長度（10-20cm）的小段。

2. 在大體積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將透析袋煮沸10分鐘。

3. 用蒸餾水*清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中將之煮沸10分鐘。

5. 冷卻后，存放于4度，必須確保透析袋始終浸沒在溶液內(nèi)。從此時起取用透析袋是必須戴手套。

6. 用前在透析袋內(nèi)裝滿水然后排出，將之清洗干凈。

透析袋寬度：31mm

截留分子量：100-500D

長度：0.5米

材質(zhì)：再生纖維素

使用前只需用水漂洗，即可去除膜表面的防腐劑。

應(yīng)用

• 去除鹽分、表面活性劑以及溶劑

• 緩沖液置換或 pH 值調(diào)整

• 蛋白質(zhì)、多肽或抗體濃縮

• DNA電洗脫

• 電泳前蛋白質(zhì)準備

• 去除小分子雜質(zhì)

• 親和研究（受體-配體結(jié)合研究）

• 組織培養(yǎng)物的提取純化

    對樣品進行透析之前，需要考慮諸多因素。影響透析效率的一些因素包括樣品溶質(zhì)、膜化學相容性、膜截留分子量、透析緩沖液性質(zhì)、透析體積、溫度等。因此，有必要針對下列透析程序作一些優(yōu)化。

透析參數(shù)和截留分子量的選擇

樣品和透析溶液濃度
    一般除要保留的大分子產(chǎn)品和要去除的雜質(zhì)外保持* 
    樣品/透析液使用量比例
    常用 1 : 50 - 500 體積比
    膜截留分子量 /MWCO 
    要保留分子量的50-90%
    樣品體積和透析膜面積比例
    長度 (10-15 厘米) x FW (24-30 毫米) , 2-5 ml/cm
    溫度
    常用室溫 (20-25 C) “靜態(tài)” 透析并配合攪拌 
    溶液置換間隔
    3 次：  3-4 小時, 6-8 小時 & 16-24 小時

 透析時間
1 – 2 天

實驗室透析 常見問題解答

Q1：如何準備透析膜管？
透析膜管的準備因膜管材質(zhì)和生產(chǎn)工藝的差別而有所不同。

注意，我們不推薦煮沸處理，因其可能損壞膜管并改變膜孔徑。
A) 生物技術(shù)級 RC、CE 及 PVDF 膜可以用 DI 水沖洗 15-30 分鐘，去除防腐劑。
B) Spectra/Por ○
R 7 標準級 RC 膜已經(jīng)預處理，去除了重金屬和硫化物，只需在去離子水中浸泡 15-30 分鐘，去除防腐劑即可。
C) Spectra/Por ○
R 1-6 標準級 RC 膜，一般情況下，在水中漂洗足以去除甘油或防腐劑，而對于親和研究之類極其敏感的透析應(yīng)用或者重金屬及硫化物會影響透析樣品下游分析的應(yīng)用，可能需要一些額外的處理以去除在生產(chǎn)過程中引入的痕量水平重金屬及硫化物，索萊寶提供兩種膜預處理溶液：重金屬漂洗液及硫化物清除液，具體產(chǎn)品信息請參考“膜透析配件”網(wǎng)頁說明。

Q2：透析的原理是什么？一般需要多長時間才能完成？
    透析是指溶質(zhì)在濃度梯度的驅(qū)使下，選擇性擴散通過半透膜，從而達到大/小分子分離，膜兩側(cè)濃度平衡，即小顆粒的溶質(zhì)通過膜，而大分子物質(zhì)不能通過，被截留在膜另一邊。
如果將樣品置于透析膜管內(nèi)，通過置換膜管外部的透析緩沖液，可將小顆粒物質(zhì)清除，從而
達到純化大分子物質(zhì)的目的。一般來說，之內(nèi)置換 3-5 次緩沖液，然后在室溫條件下，
放在攪拌臺上隔夜透析，即可達到高效的透析結(jié)果。標準的透析操作一般需要 16-24 小時。
許多因素會影響透析效率，包括：擴散系數(shù)、pH 值、溫度、時間、物質(zhì)濃度、樣品體積、
透析緩沖液體積、透析緩沖液的置換次數(shù)、膜表面積、膜厚度、分子帶電荷及緩沖液攪拌速
率。

Q3：透析一個樣品需要多少體積的透析緩沖液？緩沖液置換頻率怎么安排？
    透析緩沖液的體積越大，小分子擴散的驅(qū)動力越大。我們一般推薦緩沖液和樣品的體積比為100:1。當擴散速率降低，膜兩側(cè)溶液趨于平衡時，通過置換緩沖液，可維持小分子擴散驅(qū)動力和透析速率。我們一般推薦在 12-24 小時內(nèi)，置換緩沖液 2 到 3 次，具體安排如下：*次緩沖液置換：透析開始后 2-3 小時第二次緩沖液置換：透析開始后 4-5 小時
后一次緩沖液置換：透析隔夜之前

Q4：如何選擇正確的截留分子量（MWCO）？
     截留分子量應(yīng)該竟可能的大，以使透析速率大化。但是，為了獲得大的樣品回收率，選擇的截留分子量應(yīng)少為需純化的大分子物質(zhì)分子量的一半。對于需對幾種分子進行分離的應(yīng)用，分子之間的分子量差少為 5 倍，才能完成有效的膜透析。若不能滿足分子量差的要求，可能需要使用其它的分離技術(shù)，如色譜方法或切向流過濾。

Q5：那種膜的蛋白質(zhì)結(jié)合率低？
    每種膜對不同的分子具有不同的親和性。對于球狀蛋白，相對的結(jié)合親和性由低到高為 CE<RC<PVDF。

Q6：怎樣為膜管選擇合適大小的膜夾？
    標準 RC 膜(Spectra/Por 1-7)和生物技術(shù)級 RC 膜由柔韌的再生纖維素聚合物制造，可使用任何一種透析膜夾密封。生物技術(shù)級 CE & PVDF 膜由相對剛性的聚合物制造，需要使用相對溫和的通用膜夾。鑒于通用膜夾對于所有類型的膜管都能起到很好的密封作用，如不確定選擇哪種膜夾合適，使用通用膜夾即可。標準膜夾一般只用于標準級 RC 膜管。
    膜夾的密封寬度一般需比膜管的扁平寬度長 4-10 mm。通用膜夾的小密封寬度為 50 mm。對于所有扁平寬度規(guī)格的仕必純生物技術(shù)級膜管，均有相應(yīng)的膜夾可供選擇。

Q7：透析膜的保存時間為多長？
     干包裝的透析膜可保存 5 年。濕包裝的透析膜（0.1% 的防腐劑溶液）保存期限為 3 年。輻照滅菌的透析膜可保存 1.5 年。

Q8：透析膜變干或凍存之后是否仍可使用？
     濕潤的透析膜變干之后，孔徑受到不可逆的影響，膜變得脆弱易碎，容易泄露，不推薦繼續(xù)使用。透析膜凍存之后，冰晶會使膜破裂，導致泄露，此時不推薦使用該膜。

Q9：透析膜*不含內(nèi)毒素嗎？
    仕必純確認所有透析膜不含有內(nèi)毒素，符合普通實驗室使用規(guī)格要求。

Q10：我需要擔心透析膜上的皺紋、滾痕或折線嗎？
    只要膜是完整的，滾痕或者折線不會影響膜的擴散特性。

Q11：CE 膜比 RC 膜更具剛性，且不透明嗎？
    纖維素酯（CE）膜內(nèi)的聚合物交聯(lián)形成相對剛性的晶格，而再生纖維素（RC）聚合物形成更加柔韌的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)。不透明性是由網(wǎng)格中孔眼的大小所決定的，孔眼越大，膜越不透明。

Q12：透析膜可以化學密封或熱密封嗎？
    CE 和 RC 透析膜只能機械密封，但 PVDF 透析膜可以機械密封或熱密封，通常用于樣品“封裝”目的。

Q13：處理相同的蛋白樣品，Spectra/Por ○R 透析膜可重復使用嗎？
    我們不推薦重復使用透析膜，因為特定的處理操作可能會對膜造成污染，一定的透析條件（pH 值、溫度、化學接觸等）也會對膜的完整性造成損害，和/或?qū)е滦孤?，特別是在打開和重新夾上膜夾時。

Q14：膜孔徑有多，什么是 MWCO？
     透析膜微觀下呈海綿狀結(jié)構(gòu)，因此，更適合通過評定其截留性能來間接地定義“孔徑”，亦即“截留分子量”（Molecular Weight Cut Off，MWCO）。MWCO 定義為在 17 個小時內(nèi)，膜截留率為 90%的溶質(zhì)分子量?；诖硕x，選擇透析膜時，MWCO 應(yīng)小于需要截留的分子的大小。

Q15：透析膜 Spectra/Por ○
R 2 和 4 有什么區(qū)別？
Spectra/Por ○
R 2 和 4 都有 12-14 kD 的截留分子量。Spectra/Por ○ R 透析膜更適合溫和透析，
Spectra/Por ○
R 2 可提供特定的更大和更小的扁平寬度，和/或滲透性；也就是說，Spectra/Por ○ R
2 的水滲透性比 Spectra/Por ○
R 4 更*。

Q16：關(guān)于膜表面積和樣品量之間的關(guān)系有沒有經(jīng)驗法則？
    表面積與體積的比值取決于膜管扁平寬度。如果有兩段相同長度的膜管，扁平寬度較小的膜管具有較高的比表面積，而扁平寬度較大的膜管比表面積相對較小，也就是說，前者的透析速率更快。原因是扁平寬度較小的膜管，溶質(zhì)的擴散距離較短，溶質(zhì)之間通過膜孔的競爭也較小。而扁平寬度大，亦即溶質(zhì)到達膜表面的距離也較長，溶質(zhì)之間對膜孔的競爭也較大。一般而言，比表面積越大，透析越快。

Q17：如果膜兩側(cè)的摩爾滲透壓濃度相等，但濃度梯度仍然存在，物質(zhì)的通過效率如何？
    大多數(shù)透析結(jié)束時膜兩側(cè)滲透壓相同。透析過程是由膜管內(nèi)外兩側(cè)的濃度梯度驅(qū)動的。如果滲透壓力有很大的差別，水會通過膜以平衡膜兩側(cè)的滲透壓。如果過多的水通過膜，透析膜管可能會隨水運動的方向增大或縮小，在體積增加到一定程度時，有可能導致膜夾松動或膜管破裂。

Q18：進行超濾時，透析膜能承受多大的壓力？
    透析膜設(shè)計不適合用于壓力過濾。在不影響截留分子量的前提下，大推薦壓力為 1.5 psi。

Q19：一般推薦使用哪種透析液（緩沖液）？
    生物分子必須保存在嚴格的 pH 值控制條件下，以穩(wěn)定其分子極性。典型的透析緩沖液 pH范圍為 6-8。以下為常用的幾種可以作為緩沖液的生化溶液：
?  水
?  PBS
?  TBS
?  HEPES
?  氨基酸緩沖液

Q20：為什么使用微米 vs 道爾頓（MW）單位，怎么轉(zhuǎn)換？
     溶解的分子大小以分子量來定義，單位為道爾頓，而顆粒和細胞大小常以直徑來定義，由于分子的結(jié)構(gòu)和形態(tài)不同，相同分子量的物質(zhì)，分子大小和形態(tài)可能相差較大，兩者之間沒有的對應(yīng)關(guān)系。出于這個原因，許多常見的生物材料都已特別定性，并將大約的尺寸標注在轉(zhuǎn)換表上作為估算的參考，以用于透析、超濾和微濾應(yīng)用。道爾頓與微米單位之間的轉(zhuǎn)化，請參考索萊寶“孔徑表”。

Q21：對于鹽濃度較高的樣品，佳的透析方法是什么？

     如果可能，我們推薦使用低鹽濃度的緩沖液。不推薦直接使用純 DI 水作為緩沖液，因為滲透壓力可能將水引入膜管，使樣品體積膨脹并可能導致膜管破裂。使用一系列濃度逐漸降低的溶液作為緩沖液可防止?jié)B透壓力導致的膜管膨脹。每次緩沖液置換，可將溶質(zhì)濃度降低十分之一，也就是說，透析一個 5M NaCl 的樣品，可使用 500 mM NaCl 的緩沖液。

Q22：可以使用繩子結(jié)扎膜管，而不使用膜夾嗎？
    我們不推薦使用繩子結(jié)扎膜管。因為繩結(jié)對膜管的損害具有很大的不確定性，并且可能不能提供有效的密封，而導致泄露。只有膜夾才能提供足夠的密封性，從而保護樣品。

Q23：透析膜管應(yīng)該剪多長？
    對于每種膜管扁平寬度，仕必純提供相關(guān)的容積/長度比，可方便計算透析樣品所需的膜管長度。如果扁平寬度為 16 mm，容積/長度比為 0.79 ml/cm，要容納 5 ml 的樣品，則需要大約 6.5 cm 長的膜管。但是，為保持樣品漂浮，一般需要在頂部空間預留 10-20%膜長（約為1 cm）。此外，也需在兩端為膜夾各預留 2 cm。所以總的膜管長度應(yīng)少為 11.5 cm。
可根據(jù)以下公式計算膜管長度：
    總長度=（樣品體積）/（容積/長度）+（額外的 10-20%）+4 cm
    瀏覽網(wǎng)頁，使用仕必純透析膜管計算器，根據(jù)樣品體積和扁平寬度，計算所需的膜管長度。

實驗室耗材

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YA1072    透析袋MD34(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1073    透析袋MD44(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1074    透析袋MD55(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1075    透析袋MD77(8000-14000)D    Solarbio    5M
YA1076    透析袋MD34 ( 7000 D )    Solarbio    5M
YA1077    透析袋MD34 ( 3500 D )    Solarbio    5M
YA1078    透析袋MD44 ( 3500 D )    Solarbio    5M
YA1080    透析袋MD25(3500D )     Solarbio    5M
YA1081    透析袋MD25(7000D )     Solarbio    5M
YA1082    透析袋MD44(7000D )     Solarbio    5M
YA1083    透析袋MD55(3500D )     Solarbio    5M
YA1084    透析袋MD55(7000D )    Solarbio    5M

 透析袋 扁寬31截留分子量100-500 耗材

參考文獻：
《Antioxidant Activities of Rapeseed Protein Hydrolysates》 作者:Mu Pan， Tong S. Jiang，Jun L. Pan 期刊:Food and Bioprocess Technology 影響因子:2.998 PMID:
《Silicon-doped carbon quantum dots with blue and green emission are a viable ratiometric fluorescent probe for hydroquinone》 作者:Yingnan Liu，Yuanyuan Cao，Tong Bu，Xinyu Sun，Taotao Zhe，Chen Huang，Siyu Yao，Li Wang 期刊:Microchimica Acta 影響因子:5.479 PMID:31183545

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