2016-59
蛋白marker的作用是什么,先要要了解一下什么是蛋白marker。在WesternBlot過程中,分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細(xì)節(jié),然而就是這樣一個小細(xì)節(jié)對實驗結(jié)果有著不可忽視的作用。蛋白marker的作用:Marker是表面覆蓋有特殊反光材料的標(biāo)記物,常見形狀有球形、半球形。染色體上一個可以被識別的區(qū)域(比如限制性內(nèi)切酶的酶切點,基因的位置等)。標(biāo)記的遺傳能夠被檢測出來。標(biāo)記可以是染色體上有表達(dá)功能的部分(比如基因),也可以是沒有編碼蛋白質(zhì)功能但遺傳特性...
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2016-59
蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。那么,什么是預(yù)染蛋白marker?預(yù)染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍(lán)色染料共價偶聯(lián).可在凝膠電泳時出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的8條帶.同未預(yù)染的蛋白marker相比,預(yù)染蛋白marker因與染料共價偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發(fā)生某些改變.預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物,通過與...
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2016-59
磷酸緩沖液也叫做磷酸鹽緩沖液,英文名為PhosphateBuffer,是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液,磷酸緩沖液的配制我們一起來了解一下。先,按照下表所給定的體積,混合1mol/L的磷酸二氫鈉(單堿)和1mol/L磷酸氫二鈉(雙堿)貯液,獲得所需pH的磷酸緩沖液。配制1mol/L的磷酸二氫鈉(NaH2PO4?H2O)貯液:溶解138g于足量水中,使終體積為1L;1mol/L磷酸氫二鈉(Na2HPO4)貯液:溶解142g于足量水中使終體積為1L。1mol/L磷酸二氫鈉(...
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2016-59
磷酸緩沖液也叫磷酸鹽緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用為廣泛的一種緩沖液,磷酸鹽緩沖液是由磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉組成的溶液,那么磷酸緩沖液具體有哪些作用呢?磷酸緩沖液的作用有哪些?磷酸緩沖液主要用于一些化學(xué)實驗中不影響實驗反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值,以便讓實驗的化學(xué)反應(yīng)在佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗中的稀釋緩沖液。磷酸緩沖液的作用不僅僅如此,僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋...
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2016-56
MTT是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。MTT實驗原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值),來判斷活細(xì)胞數(shù)量,OD值越大,細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性,則表示藥物毒性越小)。該方法已廣泛用于...
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2016-56
MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide,又稱噻唑藍(lán)。用于細(xì)胞增殖及細(xì)胞活性測定和對體外細(xì)胞的細(xì)胞毒性的測定。MTT的原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臢(Zā)(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲臢(Z?。?,用酶標(biāo)儀在490nm波長處(英文說明書寫的是570nm)測定其...
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2016-56
要知道MTT法檢測細(xì)胞活性步驟先要知道MTT是什么?MTTMTT是一種粉末狀化學(xué)試劑,全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,漢語化學(xué)名為3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍(lán)。是一種黃顏色的染料。MTT法檢測細(xì)胞活性原理檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此...
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2016-54
瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂或瓊脂糖作支持介質(zhì)的一種電泳方法。對于分子量較大的樣品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔徑較大的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳常見為題都有哪些?、一、DNA帶模糊、1、DNA降解:瓊脂糖凝膠電泳試驗中要避免核酸酶污染2、電泳緩沖液陳舊:電泳緩沖液多系使用后,離子強(qiáng)度降解,PH值上升,緩沖能力減弱,從而影響電泳實驗,建議經(jīng)常更換電泳緩沖液。3、所用電泳條件不合適:電泳時電壓不應(yīng)超過20V/cm,溫度4、DNA上揚(yáng)量過多:應(yīng)減少凝膠中DNA上樣量。...
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