北京索萊寶科技有限公司
專注于生物學(xué)試劑及試劑盒領(lǐng)域
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2016-1114
dna提取是一項(xiàng)經(jīng)常要做的實(shí)驗(yàn)，下面我們就總結(jié)了四種dna提取方法并做詳細(xì)說明和比較。一.濃鹽法提取dna：A.利用RNA和DNA在電解溶液中溶解度不同，將二者分離，常用的方法是用1M氯納提取化鈉抽提,得到的DNP粘液與含有少量辛醇的CCL4一起搖蕩,使乳化,再離心除去蛋白質(zhì),此時(shí)蛋白質(zhì)凝膠停留在水相及CCL4相中間，而DNA位于上層水相中,用2倍體積95%乙醇可將DNA鈉鹽沉淀出來.B.也可用0.15MNaCL液反復(fù)洗滌細(xì)胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脫氧核糖蛋白...
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問題1：使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃？影響實(shí)驗(yàn)？產(chǎn)品批次不一樣，有些批次的瓊脂粉就是顯黃色，不是質(zhì)量問題，不影響使用。進(jìn)口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?，F(xiàn)象。問題2：凝膠強(qiáng)度？答：凝膠強(qiáng)度（1.5%）≥800g/cm2800-1200g/cm21.5g瓊脂粉溶于100ml水，溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時(shí)以上，再測(cè)定凝膠強(qiáng)度。與溫度，水質(zhì)等有關(guān)。一般瓊脂粉和卡拉膠，夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高，保存時(shí)間久，可能會(huì)有部分降解，所以要達(dá)到同樣凝膠...
查看更多2016-1114
培養(yǎng)基是供微生物、植物組織和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料。一般分為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基等，那我們常用的剛果紅培養(yǎng)基屬于哪一類的？剛果紅培養(yǎng)基屬于哪一類培養(yǎng)基：剛果紅培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,因?yàn)楹竽茉谂囵B(yǎng)基上看到因分解纖維素形成的透明圈,在液體培養(yǎng)基中不可能形成透明圈.是鑒定培養(yǎng)基,因?yàn)樵撆囵B(yǎng)基上也能生長(zhǎng)其他微生物,例如有些自養(yǎng)型微生物就能在該培養(yǎng)基上生存；不過只有纖維素分解菌周圍才會(huì)形成透明圈,從而將該菌落鑒定出來.也是區(qū)分選擇培養(yǎng)基,例如在配...
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如何選擇合適的宿主菌：1、所選的宿主菌株應(yīng)對(duì)所用質(zhì)粒的抗生素抗性基因敏感。2、如進(jìn)行藍(lán)/白斑篩選，宿主菌β-半乳糖苷酶的α-肽編碼區(qū)應(yīng)在染色體或附加體上缺失掉(lacZΔΜ15)。*0和DH5α都能用于藍(lán)/白斑篩選。3、要表達(dá)重組蛋白，可使用帶有可誘導(dǎo)的T7RNA聚合酶基因的菌株，如BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS。4、使用pGEM載體克隆大片段時(shí)(7-8kb)，經(jīng)轉(zhuǎn)化的菌株在30℃而不是在37℃生長(zhǎng)，更有利于復(fù)蘇。作簡(jiǎn)單的亞克隆連接實(shí)驗(yàn)，亞克隆轉(zhuǎn)化效率的感受...
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1.緩沖系統(tǒng)：在沒有離子存在時(shí)，電導(dǎo)率小，DNA不遷移，或遷移極慢，在高離子強(qiáng)度的緩沖液中，電導(dǎo)很高并產(chǎn)熱，可能導(dǎo)致DNA變性，因此應(yīng)注意緩沖液的使用是否正確。長(zhǎng)時(shí)間高壓電泳時(shí)，常更新緩沖液或在兩槽間進(jìn)行緩沖液的循環(huán)是可取的。2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號(hào)的瓊脂糖，其雜質(zhì)含量不同，影響DNA的遷移及熒光背景的強(qiáng)度，應(yīng)有選擇地使用。3.凝膠的制備：凝膠中所加緩沖液應(yīng)與電泳槽中的相一致，溶解的凝膠應(yīng)及時(shí)倒入板中，避免倒入前凝固結(jié)塊。倒入板中的凝膠應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡，影響電泳結(jié)果。如果...
查看更多2016-1010
SDS，這是一種常用試劑，全名是十二烷基硫酸鈉，大家經(jīng)常用到，對(duì)于分子研究的科咖們，幾乎每天都會(huì)用到。先還是讓我們來看看萊寶百科吧。萊寶百科：十二烷基硫酸鈉（SDS）是一種白色粉末狀物質(zhì)，易飄飛，是常用的生化試劑，分子式是C12H25NaSO4,CAS號(hào)是151-21-3。主要是配置各種溶液，較多用于蛋白質(zhì)電泳，變性等試驗(yàn)，也會(huì)用于質(zhì)粒的提取。具有毒性，屬于急性毒性，對(duì)呼吸道有刺激作用，容易損傷呼吸道。好了萊寶百科的解釋，我們看完了。知道了的危害，我們來了解一下防護(hù)吧！十二烷...
查看更多2016-923
RNA提取RNA提取試劑盒簡(jiǎn)介：RNA是一種重要的遺傳信息分子，因此完整RNA的提取和純化，是進(jìn)行Northern雜交、RT-PCR、定量PCR等RNA相關(guān)研究的重要前提。RNA提取的原理與方法：細(xì)胞中的RNA可以分為信使RNA、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA和核糖體RNA三大類，這三類RNA都存在于細(xì)胞質(zhì)中,因此不同組織總RNA提取的實(shí)質(zhì)就是將細(xì)胞裂解，釋放出RNA，并通過不同方式去除蛋白、DNA等雜質(zhì)，終獲得高純RNA產(chǎn)物的過程。RNA提取流程一、樣品處理從各種不同來源樣品(如細(xì)菌、酵母、血...
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常見問題未回收或回收率低可能原因膠塊未全部溶解建議解決方案溶解凝膠時(shí)應(yīng)該置于65℃水浴，不斷上下顛倒，確定膠塊*溶解后再進(jìn)行下一步操作。如果凝膠濃度較大，可增加溶膠液使用量?？赡茉蚰z塊太大(400mg)建議解決方案如果需要處理的膠塊太大，應(yīng)該先將其切成小塊，做兩次回收或選用大量型回收試劑盒?？赡茉螂娪揪彌_液pH過高建議解決方案硅膠膜在高鹽低pH值時(shí)可結(jié)合DNA，在低鹽高pH值條件下洗脫。如果電泳緩沖液pH值太高，會(huì)導(dǎo)致DNA無法結(jié)合或降低結(jié)合率，可在溶膠后加入3MNaAc...
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