2021-627
近年來,干細胞生物學(xué)以及細胞治療產(chǎn)品研究飛速發(fā)展,小分子化合物扮演了*的角色。其中包括加速干細胞生產(chǎn)、促進干細胞定向分化以及確保細胞移植后的存活、定植等。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多小分子能夠幫助hESC和hiPSC維持細胞干性,促進細胞增殖。例如GSK-3β抑制劑BIO有助于將hESC維持在未分化狀態(tài),而ROCK抑制劑Y-27632能減少解離誘導(dǎo)的細胞凋亡,增加克隆效率。組合使用小分子化合物還能促進hiPSC的產(chǎn)生,小分子BIX01294,BayK8644,RepSox,丙戊酸和維生素...
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2021-622
蛋白Marker試劑是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料共價耦聯(lián),在電泳過程中或者轉(zhuǎn)膜時可以直接觀察到。預(yù)染蛋白分子量的出現(xiàn)方便了實驗,可以幫助我們在電泳時、電泳后以及轉(zhuǎn)膜后監(jiān)測電泳情況和估計遷移率。未染色的蛋白分子量標(biāo)準是簡單的,也是準確的一種。由于沒有附帶染料分子或者是標(biāo)記分子,所示大小正好是蛋白原本的大小,是準確判斷蛋白大小必須的。未預(yù)染的蛋白Marker可分為寬分子量蛋白標(biāo)準、高分子量蛋白標(biāo)準以及低分子量蛋白標(biāo)準。1、寬分子量蛋白標(biāo)準,如果從實驗的整體考慮的,就選擇范...
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2021-611
生物試劑是指有關(guān)生命科學(xué)研究的生物材料或有機化合物,以及臨床診斷、醫(yī)學(xué)研究用的試劑。主要包括:電泳試劑、色譜試劑、離心分離試劑、免疫試劑、標(biāo)記試劑、組織化學(xué)試劑、透變劑和致癌物質(zhì)等等。試劑的存放一直是被忽略的一個問題,由于生物制品由蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核酸組成,在保存過程中必須防止失活。生物試劑的存放與運輸注意事項:1、干冰是固體二氧化碳,溫度為零下78℃,濕冰就是冰的溫度,一般為冷凍條件的溫度,如在零下20℃冷凍的冰的溫度為零下20℃。對于一些酶類等蛋白產(chǎn)品,需要干冰運輸,其...
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2021-63
WB實驗又稱免疫印跡實驗,是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù),具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。對于一直都在做蛋白研究的你,在樣品制備中的小細節(jié)你都了解嗎?這里為大家整理了蛋白樣品制備中大大小小的常見問題,一起來學(xué)習(xí)吧!1、所有WB實驗都用總蛋白就可以完成嗎?當(dāng)然不是,要根據(jù)WB的實驗?zāi)康膩泶_定提取哪類蛋白,如需驗證某些低...
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2021-525
PCR定量試劑盒的基本原理就是在PCR擴增過程中,隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增,PCR產(chǎn)物不斷積累,熒光信號也會相應(yīng)的增加,這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。PCR熒光定量是一種非常敏感的檢測方法,但是實驗室經(jīng)常開展檢測工作,一旦實驗室管理和環(huán)境控制沒有執(zhí)行到位,就存在由于交叉污染出導(dǎo)致假陽性的風(fēng)險。PCR定量試劑盒檢測出現(xiàn)假陽性的常見原因:1、實驗室污染是導(dǎo)致假陽性結(jié)果實驗室如果長期檢測陽性樣本,擴增產(chǎn)物中高濃度的目的片段很容易擴散到空氣中并不斷累積導(dǎo)致氣...
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2021-520
SOC液體培養(yǎng)基是分子生物學(xué)中常用的培養(yǎng)基,用于制備高效率的大腸桿菌感受態(tài)細胞,也用于熱激后感受態(tài)細胞的復(fù)蘇。本產(chǎn)品為即用型液體培養(yǎng)基,免去了客戶稱量、配制、滅菌、清洗等重復(fù)勞動,減少了用戶儲存、保管和購買試劑需要花費的時間,提高實驗效率。SOC培養(yǎng)基用各種營養(yǎng)成分加水配成,或用天然物質(zhì)的浸汁[麥芽汁,豆芽汁等]制成。組分均一,適宜各類微生物的營養(yǎng)生長。廣泛應(yīng)用于實驗研究及大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中,有利于廣泛獲得大量菌體或代謝產(chǎn)物。SOC液體培養(yǎng)基在靜止的條件下,在菌體或培養(yǎng)細胞的周...
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2021-513
核酸變性預(yù)制膠在分離片段DNA分子時效果很好,分辨率很高,甚至相差1bp的DNA的片段都能分開,一個標(biāo)準點樣孔中可以容納相對大量的DNA。所以常被用于蛋白印跡實驗、遺傳圖譜構(gòu)建、數(shù)量形狀基因定位、標(biāo)記輔助選擇等生物多樣性研究等。核酸變性預(yù)制膠的操作步驟:一、非變性預(yù)制膠:1、準備樣品:將樣品和loadingbuffer(5×)按照4:1混合均勻。2、準備1×runningbuffer:取200ml的5×TBEbuffer,加入去離子水至1L,制備成1×TBEbuffer。3、...
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2021-511
大家好,小編又又又來了。今天是WB最后一步了,抗體孵育到顯影過程。01一抗孵育◆封閉結(jié)束前20min準備和所需一抗數(shù)量相等的孵育盒,在孵育盒上用記號筆標(biāo)注出抗體編號及所需稀釋比。按照規(guī)定的稀釋比例進行抗體稀釋。稀釋比例建議預(yù)實驗提前摸索或者根據(jù)抗體說明書上建議?!舴忾]時間結(jié)束之后,倒掉封閉液,將稀釋好的抗體加入到槽內(nèi),將搖床放入4℃展示柜孵育過夜?!舻诙鞂u床搬出,平衡室溫搖15min,倒掉一抗工作液,加入5mLTBST潤洗膜一次,倒掉,加新的TBST洗膜5min,倒掉TB...
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