2022-915
細(xì)胞分離液是一種經(jīng)過聚乙烯吡咯烷酮處理過的硅膠顆粒,經(jīng)過高速離心后可形成連續(xù)密度梯度,由于Percoll擴(kuò)散常數(shù)低,所形成的梯度十分穩(wěn)定。分離液采用預(yù)先形成的密度梯度時可在低離心力(200~1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達(dá)到滿意的細(xì)胞分離結(jié)果。此外,細(xì)胞分離液不穿透生物膜,對細(xì)胞無毒害。因此廣泛用于分離細(xì)胞、亞細(xì)胞成分、細(xì)菌及病毒,還可將受損細(xì)胞及其碎片與完好的活細(xì)胞分離。常用于分離和傳話植物原生質(zhì)體、核、葉綠體、和線粒體。細(xì)胞分離液的配置與使用:1、不同濃度分離液的制備:先...
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2022-97
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀主要用于在減壓條件下連續(xù)蒸餾大量易揮發(fā)性溶劑。尤其對萃取液的濃縮和色譜分離時的接收液的蒸餾,可以分離和純化反應(yīng)產(chǎn)物。蒸發(fā)儀的基本原理就是減壓蒸餾,也就是在減壓情況下,當(dāng)溶劑蒸餾時,蒸餾燒瓶在連續(xù)轉(zhuǎn)動。蒸發(fā)儀由真空泵及其管路、蒸發(fā)瓶與接收瓶、冷凝管等部件組合而成。其中,影響真空度關(guān)鍵因素是:真空泵功率、體系的密閉性。其中,設(shè)備包括:真空泵、密封圈以及真空管。1、真空泵極限越低,系統(tǒng)的真空值也越低。但是,系統(tǒng)能夠形成的真空值,由旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的設(shè)備耐壓性和保證蒸餾效率時避免...
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2022-91
化學(xué)官能團(tuán)的保護(hù)和去保護(hù)在小分子化合物路線中起的*的輔助作用。自然不必說保護(hù)和去保護(hù)的選擇性好,產(chǎn)率高,要不然平白多出兩步總收率大打折扣。以胺的保護(hù)來說,在試驗操作中比較常見,一方面胺容易被氧化,或者結(jié)合酸鈍化,所以胺這種物質(zhì)本身在常態(tài)下也并不穩(wěn)定,所以很多胺的中間體產(chǎn)品基本也是以帶有保護(hù)基的形式存在。常見保護(hù)基團(tuán)有-Boc、-PMB、CH3CO-等等。一般說來,官能團(tuán)轉(zhuǎn)化算是小分子化合物路線設(shè)計中的核心;根據(jù)官能團(tuán)我們可以將各種反應(yīng)按類型劃分,如氧化反應(yīng)、還原反應(yīng)、取代、縮...
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2022-829
植物總酚測試盒的測試的意義:植物酚類物質(zhì)具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療作用,從而廣泛應(yīng)用于化妝品、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域。在堿性條件下,酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原,產(chǎn)生藍(lán)色化合物,在760nm處有特征吸收峰,測760nm處的吸光值,即可得樣品總酚含量。靈敏度高,使用方便。植物總酚測試盒在使用時應(yīng)注意的事項有:1、使用時加入試劑的順序應(yīng)應(yīng)與說明書一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。2、按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行...
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2022-89
實時定量技術(shù),是指在PCR體系中加入赫斯特?zé)晒馊玖?,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個進(jìn)程,然后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,具有特異性強(qiáng)、自動化程度高等特點。因此已得到廣泛應(yīng)用。熒光染料的諸多特點使它可以用于多種應(yīng)用,包括:qPCR,高分辨率DNA熔解曲線(HRM)分析,常規(guī)的DNA定量以及毛細(xì)管電泳。當(dāng)染料和DNA結(jié)合后,其激發(fā)和發(fā)射光譜與熒光素以及熒光染料相似。這使得該染料可以直接用于配置了488nm...
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2022-81
AP標(biāo)記抗體稀釋液適用于免疫組織化學(xué)與免疫印跡等實驗中AP標(biāo)記抗體的稀釋。稀釋液中添加了抗體保護(hù)劑和穩(wěn)定劑等成分,有效增加了稀釋后AP標(biāo)記抗體的穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的抗體稀釋液常用的有:脫脂奶粉、TBST、PBST、BSA、市售的抗體稀釋液。在選擇抗體稀釋液需要注意的問題有哪些呢?1、脫脂奶粉不能用于磷酸化蛋白,保存時間短,顏色變綠,要更換新的抗體,昂貴的抗體不建議使用。2、PBST不能用來稀釋堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的抗體,含AP標(biāo)記的二抗不能使用PBST稀釋。3、抗BSA的抗體不能...
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2022-729
GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶,該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS染色的實驗?zāi)康氖菍χ参飿颖具M(jìn)行染色,因為絕大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在內(nèi)源GUS活性,因此GUS基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報告基因。GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應(yīng)條件下,β-葡萄糖...
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2022-712
SOC液體培養(yǎng)基是分子生物學(xué)常用的大腸桿菌培養(yǎng)基,與LB培養(yǎng)基相比,SOC培養(yǎng)基中含有兩倍多蛋白胨,蛋白胨中富含氨基酸及多肽。另外,SOC培養(yǎng)基中含有鎂離子,鎂離子是高密度培養(yǎng)必須的離子。利用培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌在普通條件(250rpm)下?lián)u瓶培養(yǎng),菌濃可達(dá)到OD6003-5左右,如果提高轉(zhuǎn)速到350rpm,OD600能夠達(dá)到10-15。那么SOC培養(yǎng)基與SOB培養(yǎng)基有什么區(qū)別呢?SOB培養(yǎng)基配方如下:2.0%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物、10mM氯化鈉、2.5mM氯化鉀、10...
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